肾脏病与男科杂志

来源文章
:2017  |  :4  |  问题 :4  |  :121--129

尿中性粒细胞明胶酶相关的脂蛋白在埃及儿童中作为特发性肾病综合征的预后生物标志物


Mohamed Abd Elaziz El-Gamasy,Maher Ahmed Abdelhafez,Mohammed M Barr,Mostafa Mansour Mehrez,Mohammed A Nassar,Mohsen M Eldeeb,Mohamed Abdelmageed 
 坦塔大学医学院儿科学系,埃及加比亚省坦塔

通讯地址:
Mohamed Abd Elaziz El-Gamasy博士
塔尔大学医院儿科,加尔坦塔,埃尔吉希街
埃及

抽象

背景与目标: 重要的是要区分类固醇敏感性肾病综合征(SSNS)和类固醇抵抗性肾病综合征(SRNS),以避免在后者中进行最初的全剂量类固醇治疗。中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)是急性肾脏损伤(AKI)的生物标志物,即使在慢性肾脏疾病(CKD)之上也是如此。目的是确定特发性肾病综合征(INS)儿童的尿NGAL水平,作为INS的预后因素,它可以在INS的早期预测类固醇抵抗。 主题与方法: 本研究针对90例在坦塔大学医院儿科肾脏病科住院的INS儿童进行。三十名年龄和性别相同的健康儿童作为对照组。将受试者分为三组:第1组(SSNS),第2组(SRNS)和第3组(对照组)。对患者和对照组进行临床评估,实验室检查,其中包括24小时尿液收集,包括尿量和蛋白质,全血细胞计数,血清胆固醇,血清白蛋白,血尿素,血清肌酐,以及通过酶联免疫吸附法测定的尿NGAL。 结果: There was a significant increase in uNGAL levels in SRNS when compared with SSNS or controls. There was no significant difference in uNGAL levels between Group 1 and Group 3. ROC curve of uNGAL to predict SRNS had cutoff value >315 at the area under the curve 0.9, sensitivity 86.7%, and specificity 93.3%. There was a significant positive correlation between urinary NGAL level and age of patients and disease duration and serum creatinine level. 结论: 尿液NGAL可预测儿童INS中的SRNS。



如何引用本文:
Elaziz El-Gamasy MA,Abdelhafez MA,Barr MM,Mehrez MM,Nassar MA,Eldeeb MM,Abdelmageed M.尿中性粒细胞明胶酶相关的脂钙素是埃及儿童特发性肾病综合症的预后生物标志物.J Integr Nephrol Androl 2017; 121 -129


如何引用此URL:
Elaziz El-Gamasy MA,Abdelhafez MA,Barr MM,Mehrez MM,Nassar MA,Eldeeb MM,Abdelmageed M.尿中性粒细胞明胶酶相关的脂蛋白是埃及儿童特发性肾病综合征的预后生物标志物。 J Integr Nephrol Androl [在线丛书] 2017 [引用 2021年1月30日]; 4:121-129
可从: http://www.topworldnet.com/text.asp?2017/4/4/121/222062


全文



 Introduction



特发性肾病综合征(INS)的类固醇耐药性与不良结局密切相关,包括进展为终末期肾病(ESRD)。[1]尿液已经为AKI的早期检测提供了有希望的标志物[2],甚至在CKD上也是如此。它们包括胱抑素C,[3]微量白蛋白尿,[4] N-乙酰基-β-D氨基葡萄糖苷酶,[5]白介素-18,胎球蛋白,[6]视黄醇结合蛋白,簇蛋白,[7]富含半胱氨酸的蛋白[8]和与中性粒细胞明胶酶相关的尿钙蛋白(uNGAL)。[9]后者是AKI早期诊断和预后的标志物[10],其中uNGAL与AKI的程度相关,并且在进行性但不稳定的肾衰竭患者中显着增加。[1],[11] uNGAL在肾脏中显着增加。移植肾小管病变的患者。[12]此外,在造影剂诱发的肾毒性和顺铂肾病患者中证实了uNGAL作为肾毒性的预测生物标志物[13]。小儿肾小球滤过率(GFR)降低的儿童的uNGAL水平显着升高。[15]

本研究的目的是确定INS儿童的尿NGAL水平作为预后因素,因为它可以在INS早期预测类固醇抵抗。

 Subjects and Methods



研究设计和环境

本研究是在坦塔大学医院研究伦理委员会中心批准并获得所包​​括儿童父母的知情同意或口头同意后进行的。方法是对90例坦塔大学医院儿科肾脏病科收治的特发性肾病综合征(INS)患者进行研究,并以30名相同年龄和性别的健康儿童作为对照组。他们在取样时的年龄从1.5岁到10岁不等。将受试者分为3组,第1组包括45例类固醇敏感性肾病综合征(SSNS)患者(男39例,女性6例),第2组包括45例类固醇抵抗性肾病综合征(SRNS)患者(36例男性,9例女性) )和第3组,其中包括30名对照对象(男性24位,女性6位)。

纳入标准

研究纳入了2016年6月至2017年6月因INS被坦塔大学医院收治的所有儿童。

排除标准

1岁前出现肾病综合征,继发性肾病综合征的已知病例,与尿路感染(UTI)相关的肾病综合征,缓解期的肾病综合征和诊断延迟的患者(水肿发作超过1周) )。

INS was diagnosed according to kidney disease improving global outcome guidelines by the presence of nephrotic range proteinuria (>40 mg/m 2 per hour), generalized edema, hyperlipidemia and hypoalbuminemia (2 per day) within 6 weeks of therapy. A complete remission was defined by a marked reduction in proteinuria (2 per hour or urinary albumin dipstick is trace for 3 consecutive days) in association with a resolution of edema. Steroid-dependent nephrotic syndrome (SDNS) was defined as an initial remission followed by two or more relapses during the steroid reduction period or within 15 days after tapering of prednisone therapy. A relapse was defined by the recurrence of severe proteinuria (>40 mg/m 2 per hour or urinary albumin dipstick >3+ on 3 successive days), often with a recurrence of edema. SRNS was considered after 6 weeks of daily full dose steroid therapy plus three methyl prednisone pulse therapy without improvement of proteinuria.[16]

治疗方案

所有患者最初都在INS初次发作时接受泼尼松(每天60 mg / m 2)治疗,持续30天。口服泼尼松以每天60 mg / m 2的剂量治疗复发,直至缓解再加5天,然后将泼尼松剂量每隔一天(EOD)逐渐减少至40 mg / m 2,持续4周,然后减少15 mg / m 2 EOD /周至维持缓解和最终终止治疗所需的最低剂量(如果适用)。

Steroid-sparing agents were introduced if the patient presented frequent relapses (>2 relapses per year), if the steroid dosage to maintain remission was ≥20 mg/m 2 EOD, if steroid-related side effects were unacceptable in terms of growth retardation or obesity despite adequate diet or if SRNS was diagnosed. Cyclosporine A in dose of 4–6 mg/kg per day was used to treat high dose SDNS and its dose was adjusted to maintain a trough serum level of cyclosporine A between 100–150 ng/mL in the first 3 months of therapy and 50–100 ng/mL later on as long as the patient was in remission. Cyclophosphamide in a dose of 2 mg/m 2 per hour for 3 months can be used as an alternative [Figure 1].[17]{Figure 1}

所有患者和对照均接受以下检查

历史记录

关于肾病综合征发病的年龄,性别,特应性疾病的存在(患者或其家人中的哮喘,过敏性鼻炎,过敏性结膜炎和/或荨麻疹),病程,对激素治疗的反应第一种表现,复发频率,治疗过程中使用的免疫抑制药物,类固醇相关的不良反应(如肥胖,高血压,骨痛或身材矮小),以及其他免疫抑制药物的不良反应。

临床检查

血压,体重,水肿检查,腹水as击,器官肥大,胸膜积液或胸腔感染的cus诊,心包积液的per诊。

实验室调查

实验室检查包括24小时尿液收集,用于尿量和蛋白质估算,全血细胞计数(CBC),血清胆固醇,血清白蛋白,血尿素,血清肌酐和酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒测定尿NGAL。[ 18]

实验室调查取样

从患者和对照组中抽取6 ml静脉血样本,通过使用乙二胺四乙酸度假管将2 mL血液样本用于CBC估计,并将剩余的血液放入平管中进行离心和分离用于估计的血清血清胆固醇,尿素,肌酐和白蛋白水平。

尿液采样-在INS发作的第一周清晨从患者那里收集尿液样本,并从对照组中收集尿液样本。尿液样品采用两种技术之一收集,即采用8根法国聚乙烯饲管,采用中流捕捞法或导尿管法,将尿液储存-将尿液样品放入无菌容器中,然后离心20分钟。将尿液样本的上清液收集到干净的试管中,等分并冷冻于 −20°直到尿液NGAL测定为止。在测定前将样品解冻并充分混合,以避免重复冷冻/解冻循环的错误结果。通过ELISA测定的uNGAL使用可特异性检测人NGAL的市售测定法(NGAL ELISA试剂盒036; Bioporto,Grusbakken,丹麦)进行。[18]

将其他24小时的尿液收集样品保存在冰箱中的无菌容器中,温度为2级°C to 8°然后,在即将进行尿液评估和收集尿蛋白/ 24小时之前,将样品重新加热至室温。

统计分析

使用Windows的社会科学统计软件包(SPSS)版本16(SPSS,Inc.,Chicago,IL,USA)收集和分析数据。所有数据均以平均值表示±SD组之间的参数比较使用了学生t检验,卡方检验,Mann-Whitney U检验,线性相关系数(r),接收者工作特征(ROC)曲线分析和方差分析(ANOVA)检验。所有统计检验均为双尾检验,P<0.05被认为具有统计学意义。敏感性是指疾病存在时测试结果为阳性的概率(真实阳性率,以百分比表示)。特异性是当疾病存在时测试结果为阴性的概率(真实阴性率,以百分比表示)。阳性预测值(PPV)是当测试呈阳性时疾病存在的概率。阴性预测值(NPV)是当测试阴性时疾病存在的可能性。准确度是所有患者的阳性阳性率与阴性阴性率之比。[19]

 Results



[表1]总结了所研究患者和对照的人口统计学和临床​​数据。在年龄,性别分布,特应性反应的阳性家族史或糖皮质激素治疗的副作用频率方面,研究组之间无显着差异。与SSNS相比,SRNS的体重,收缩压,疾病持续时间和复发次数显着增加(P<0.05)。关于患者接受的类固醇激素治疗药物,39例类固醇耐药患者接受环孢霉素A的比例为86.7%,但没有任何对类固醇敏感的患者接受。在我们的研究中,没有受试者接受环磷酰胺或霉酚酸酯的治疗。血管紧张素转换酶抑制剂(ACE-Is)或血管紧张素受体2阻滞剂(ARBs)不仅获得21(46.7)%)的SRNS患者,但也有任何SSNS患者接受。 [表2]汇总了研究对象和对照组的实验室数据。{表1} {表2}

[Table 3] compared between the studied groups as regard uNGAL levels, there was a highly significant increase in uNGAL levels in Group 2 when compared to Group 1 and Group 3 (P < 0.01). There was no significant difference in uNGAL levels between Group 1 and Group 3 (P > 0.05).{Table 3}

关于我们研究中的估计肾小球滤过率(eGFR),SSNS,SRSN患者或对照组在eGFR方面无统计学意义的差异(SSNS,SRSN患者和对照组)。

[Table 4] and [Figure 2] and [Figure 3] show ROC curve of uNGAL to predict SRNS with cutoff value >315 ng/mL, sensitivity 86.7%, specificity 93.3%, PPV 92.9%, NPV 87.5%, accuracy of 92.4%, and area under the curve 0.9.{Table 4}{Figure 2}{Figure 3}

[表5]总结了uNGAL水平与所研究患者的临床和实验室数据之间的相关性:SRNS患者尿NGAL水平与患者年龄和疾病持续时间之间存在显着正相关(P<0.05)[图4]。尿NGAL水平与血清​​肌酐水平之间也呈高度显着正相关(P<0.01)[图5]。{表5} {图4} {图5}

 Discussion



类固醇抗药性或类固醇依赖性NS与不良预后密切相关,包括免疫抑制剂药物的副作用和发展为ESRD。没有诊断标记可区分SSNS和SRNS。但是,病理诊断可帮助预测类固醇耐药性约为70%FSGS病例与不良预后显着相关。[20]

然而,除非具有非典型特征,否则儿童一般不会在表现时进行活检,因为在长期预后中,对类固醇的反应比组织学更好地预测了其发生率。[21]

由于该病的病灶性质,对儿童进行一次肾脏活检往往会误诊FSGS。[22]

高剂量类固醇治疗的最初每日延长的每日疗程同时用于治疗和诊断目的。

识别预测类固醇反应性的标志物将使INS患者受益,并为其设计更好的治疗策略。 NGAL已被证明是CKD进展的有力独立危险指标。[23]

在这项研究中,我们旨在确定尿液NGAL测量是否可用于区分SRNS和SSNS。研究结果表明,与SSNS和对照组相比,SRNS患者的尿NGAL显着增加。

In the present study, uNGAL levels were statistically and significantly increased in patients with SRNS when compared to both SSNS and control groups (P < 0.05). No statistically significant difference between SSNS and control groups (P > 0.05). As regard to the concomitant evolution of the major end-points values of other urinary indicators for SRNS, there was no statistically significant difference between SSNS, SRSN patients or controls as regard urinary protein per 24 h collected urine analysis. Regarding eGFR in our study, there was no statistically significant difference between SSNS, SRSN patients or controls as regard eGFR (mean values were 150, 146, and 156 mL/m 2 per minute in SSNS, SRSN patients and control groups, respectively).

Urinary NGAL levels showed a strong predictor of steroid resistance in INS at cutoff value >315 ng/mL with sensitivity 86.7% and specificity 93.3%. These results are consistent with our hypothesis that nephrotic patients who are steroid resistant have a high risk of progression, while patients with SSNS are typically not progressive and higher levels of urinary NGAL were found in patients with progressive CKD.[24]

在本研究中,尿中NGAL水平的升高与疾病严重程度之间存在显着的相关性(通过血清血清血清中的血清铁蛋白(P=0.004)。这与其他研究表明,CKD中eGFR证实尿NGAL水平与肾功能呈负相关[25]。

SRNS中环孢菌素A在尿液NGAL升高中的作用是有争议的。由于进行性肾小球血管收缩和肾小管萎缩,环孢霉素A的肾毒性可增加尿NGAL水平。[26]

In the present study, we followed the serum trough levels of cyclosporine A every 3 months. Our protocol was to control serum levels >100 ng/mL in the first 3 months of treatment and we accepted levels 等。 found elevated uNGAL in five cases of NS at presentation, which decreased after the treatment.[27]

Bolignano等。发现蛋白尿性特发性肾小球肾炎患者uNGAL与血清肌酐水平呈正相关。[23]

大多数研究NGAL与肾功能其他参数之间关系的研究都发现uNGAL与血清肌酐水平,eGFR和蛋白尿之间存在相关性。我们还证实了NGAL与血清肌酐水平之间呈正相关,这与其他作者(例如Bolignano等)报道的结果一致。和Malyszko等人[25],[28]

我们的目标是利用这些试验数据来强调多中心前瞻性研究的重要性,在该研究中,我们可以捕获大量INS患者并在进行治疗前从基线获得NGAL水平,并纵向跟踪疾病进展和NGAL水平。我们可以使用此研究模型来确定较高的初始NGAL水平是否可以预测Bolignano等人发现的肾功能恶化。其他形式的CKD。[24]

随时间推移跟踪这些患者的NGAL水平的另一个好处是可以确定NGAL是否可用于检测对治疗的早期反应。可以用作替代终点的生物标志物在临床试验中很有价值,并且可以加快药物开发的速度。来自纵向研究的数据还将使我们能够确定尿液NGAL水平是否可用于预测治疗反应。虽然尿液生物标志物的存在不可能与其他临床发现一起最终用于明确诊断的活检,但它可以为医师提供有价值的信息,从而更有效地规划NS患者的个性化治疗策略。

ACEI和ARB对血清肌酐,蛋白尿,e GFR和uNGAL作为ACEI(例如0.25剂量的卡托普利或依那普利)的数据解释没有偏见–据报道每天0.5 mg / kg可使肾病范围蛋白尿显着减少50%从基线由肾血管性高血压和继发性FSGS引起,甚至导致SRNS患者完全缓解。它们通过降低GFR而成为一种肾脏保护剂,但需要进一步研究以扩大销售量以确认这些观察结果。 ACEIs也可以降低血清脂质水平。 ARB,例如剂量为0.75的氯沙坦–每天1 mg / kg具有与ACEIs类似的作用。[29]

我们的研究并非没有局限性。首先,这是一项单中心,横断面的初步研究,研究对象是一小部分已经在入组时就开始治疗的患者。这限制了我们可以得出的尿NGAL值预测NS患者类固醇反应性的结论。其次,患者组的年龄和从SRNS组获得的NGAL数据均存在很大程度的差异。由于数据不是正态分布的,因此我们使用非参数统计来分析数据。在INS中研究类固醇反应性时,这种变异性是固有的,并且在少数患者群体中会被放大。

 Conclusions



Urinary NGAL can be used as a useful diagnostic biomarker to predict steroid responsiveness or resistance in children with INS (uNGAL is a differentiating marker between SSNS and SRNS) at cutoff value >315 ng/mL with sensitivity 86.7% and specificity 93.3%.

推荐建议

尿NGAL水平具有诊断和预后价值,因为它可以预测儿童INS中的类固醇反应或耐药。

财政支持和赞助

零。

利益冲突

没有利益上的冲突。

参考文献

1Bennett MR,Piyaphanee N,捷克K,Mitsnefes M,Devarajan P. NGAL在特发性肾病综合征中区分类固醇敏感性。 Pediatr Nephrol 2012; 27:807-12。
2Bennett MR,Nehus E,Haffner C,Ma Q,DevarajanP。急性肾脏损伤生物标志物的儿科参考范围。 Pediatr Nephrol 2015; 30:677-85。
3Russo LM,Sandoval RM,Campos SB,Molitoris BA,Comper WD,Brown D, 等。 肾小管摄取受损解释了早期糖尿病肾病中的蛋白尿。 J Am Soc Nephrol 2009; 20:489-94。
4Zhang Z,Lu B,Ni H,Sheng X,Jin N.微量白蛋白尿可以预测危重病败血症患者急性肾损伤的发生。 J Nephrol 2013; 26:724-30。
5Hong JD,Lim IS。肾小球滤过率与尿液的相关性 N 慢性肾小球疾病持续性蛋白尿患儿的乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶。韩国J小儿科2012; 55:136-42。
6周虹,休伊特SM,袁PS,Star RA。急性肾损伤生物标志物–需求,现状和未来的希望。 Nephrol自我评估计划2006; 5:63-71。
7Adiyanti SS,Loho T.急性肾损伤(AKI)生物标志物。印度尼西亚药学学报2012; 44:246-55。
8赖CF,陈永明,蒋万华,林思林,郭学林,蔡TJ, 等。 富含半胱氨酸的蛋白质61在阻塞性肾纤维化中起促炎作用。公共科学图书馆一期; 2013年; 8:e56481。
9Bignami E,Frati E,Ceriotti F,Daverio R,Silvetti S,Landoni G, 等。 尿中性粒细胞明胶酶相关的脂蛋白是心脏手术后重症监护病房住院时间延长的早期预测指标。 Ann Card Anaesth 2012; 15:13-7。
10Briguori C,Quintavalle C,Donnarumma E,Condorelli G.对比剂诱导的急性肾损伤的新型生物标志物。生物医学研究报2014; 2014:568738。
11巴拉加斯N,邱A,霍尔曼M,尼古拉斯TL,德瓦拉扬P,巴拉施J 等。 NGAL-siderocalin在肾脏疾病中的作用。 Biochim Biophys Acta 2012; 1823:1451-8。
12Sise ME,Forster C,歌手E,Sola-Del Valle D,Hahn B,Schmidt-Ott KM, 等。 尿中性粒细胞明胶酶相关的脂蛋白可识别单侧和双侧尿路阻塞。 Nephrol Dial Transplant 2011; 26:4132-5。
13Sargentini V,Mariani P,D'亚历山德罗(Alessandro M),皮斯托莱斯(Vistolesi)V,劳雷塔(Lauretta)MP,帕西尼(Pacini)F, 等。 NGAL作为成人心脏手术患者急性肾损伤的早期生物标志物的评估。 J Biol Regul 首页ost代理商2012; 26:485-93。
14林慧云,李世昌,林SF,萧宏华,刘玉春,杨卫华, 等。 尿中性粒细胞明胶酶相关的脂质运载蛋白水平预测顺铂诱导的急性肾损伤优于白蛋白尿或尿半胱氨酸蛋白酶抑制剂C水平。高雄医学学报2013; 29:304-11。
15西田M,川胜H,大仓Y,滨冈K.慢性肾脏病患儿的血清和尿中性粒细胞明胶酶相关的脂蛋白水平。 Pediatr Int 2010; 52:563-8。
16Lombel RM,Gipson DS,Hodson EM,肾脏疾病:改善全球成果。类固醇敏感性肾病综合征的治疗:KDIGO的新指南。 Pediatr Nephrol 2013; 28:415-26。
17Ravani P,Magnasco A,Edefonti A,Murer L,Rossi R,Ghio L, 等。 利妥昔单抗对类固醇和钙调神经磷酸酶依赖性肾病综合征患儿的短期影响:一项随机对照试验。 Clin J Am Soc Nephrol 2011; 6:1308-15。
18Piyaphanee N,Ma Q,Kremen O,捷克K,Greis K,Mitsnefes M, 等。 发现和初步验证α1-B糖蛋白片段化是小儿类固醇抵抗性肾病综合征的差异尿生物标志物。蛋白质组学临床研究2011; 5:334-42。
19Khothari CR,编辑。研究方法论:方法和技术。 2nd ed。新德里:New Age International; 2012。 95-7。
20Gipson DS,Chin H,Presler TP,Jennette C,Ferris ME,Massengill S, 等。 儿童FSGS缓解和ESRD的差异风险。 Pediatr Nephrol 2006; 21:344-9。
21Eddy AA,Symons JM。儿童期肾病综合征。柳叶刀2003; 362:629-39。
22Gulati S,Godbole M,Singh U,Gulati K,SrivastavaA。患有特发性肾病综合征的儿童是否有代谢性骨病的风险? Am J Kidney Dis 2003; 41:1163-9。
23博利尼亚诺D,科波利诺G,坎波S,阿洛伊西C,尼科西亚G,弗里西纳N, 等。 尿中性粒细胞明胶酶相关的脂钙蛋白(NGAL)与蛋白尿症患者的肾脏疾病严重程度有关。 Nephrol Dial Transplant 2008; 23:414-6。
24Bolignano D,Lacquaniti A,Coppolino G,Donato V,Campo S,Fazio MR, 等。 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和慢性肾脏疾病的进展。 Clin J Am Soc Nephrol 2009; 4:337-44。
25Bolignano D,Coppolino G,Lacquaniti A,Nicocia G,Buemi M.尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在肾功能恶化的大蛋白尿患者中的病理和预后价值。肾脏血液出版社研究2008; 31:274-9。
26Wasilewska A,Zoch-Zwierz W,Taranta-Janusz K,Michaluk-Skutnik J.中性粒细胞明胶酶相关脂钙蛋白(NGAL):环孢菌素肾毒性的新标志物? Pediatr Nephrol 2010; 25:889-97。
27Kuwabara T,Mori K,Mukoyama M,Kasahara M,Yokoi H,Saito Y, 等。 尿中性粒细胞明胶酶相关的脂质运载蛋白水平反映了对肾小球,近端肾小管和远端肾单位的损害。肾脏国际2009; 75:285-94。
28Malyszko J,Malyszko JS,Bachorzewska-Gajewska H,Poniatowski B,Dobrzycki S,Mysliwiec M, 等。 中性粒细胞明胶酶相关的脂蛋白是慢性肾脏病患者和同种异体肾移植患者肾功能的一种新的敏感标记。 Transplant Proc 2009; 41:158-61。
29Bennett MR,Pleasant L,Haffner C,Ma Q,Haffey WD,Ying J, 等。 一个新颖的生物标志物小组,以识别儿童特发性肾病综合征的类固醇抵抗。 Biomark Insights 2017; 12:1177271917695832。